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細(xì)胞學(xué)堂 | UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細(xì)胞)空泡產(chǎn)生的原因及解決方法
來源:Pricella 瀏覽量: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-28 14:00:05
UMNSAH/DF-1細(xì)胞在收貨時(shí)經(jīng)常會遇到“空泡”問題,今天給大家分享一下,空泡產(chǎn)生的原因,以及解決空泡問題的方法。
先了解一下UMNSAH/DF-1細(xì)胞的各項(xiàng)信息,如下:
細(xì)胞名稱:UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細(xì)胞)
種屬:家雞
組織來源:胚胎,自發(fā)永生化
生長特性:貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
生長培養(yǎng)基:DMEM+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣;5%CO2
溫度:39℃
推薦傳代比例:1:3-1:4
凍存液配方:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
細(xì)胞中的空泡一般指在光學(xué)顯微鏡下可見的, 具有不同于細(xì)胞質(zhì)光學(xué)特征的泡狀物。細(xì)胞中形成空泡的過程和現(xiàn)象稱為空泡化。空泡可以來源于細(xì)胞內(nèi)所有膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器,如線粒體,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),溶酶體,高爾基體,自噬溶酶體等。
以 UMNSAH/DF-1細(xì)胞為例,在發(fā)貨前,細(xì)胞狀態(tài)是正常的(如圖1),可是在收貨后卻產(chǎn)生了很多空泡。這究竟是什么原因呢?
其實(shí),這是因?yàn)閁MNSAH/DF-1細(xì)胞在發(fā)貨過程中,容易受到溫度波動影響,而導(dǎo)致的細(xì)胞空泡增多。當(dāng)細(xì)胞受到外界環(huán)境因素影響如溫度時(shí),細(xì)胞會發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)。細(xì)胞溫度降低時(shí),細(xì)胞膜上磷脂分子的運(yùn)動減慢,流動性降低,從而降低了細(xì)胞膜對物質(zhì)的通透性,鈣離子內(nèi)流,從而導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)中色素堆積,空泡形成。
處理方法:
將收到的細(xì)胞正常傳代,觀察空泡是是否有減少,若空泡仍有很多,可增加傳代次數(shù),一般正常傳代后這種情況就會有所好轉(zhuǎn)!(如圖2所示。)
圖1. UMNSAH/DF-1發(fā)貨圖片
圖2. UMNSAH/DF-1收貨圖片(左) 傳代培養(yǎng)后圖片(右)
注意
注意
1
細(xì)胞培養(yǎng)的最佳溫度主要取決于細(xì)胞供體的體溫,此外也受到解刨部位體溫差異的影響。對于不同的動物細(xì)胞,所需要的培養(yǎng)溫度也有所不同,對于禽類動物細(xì)胞,最佳培養(yǎng)溫度為39℃,所以UMNSAH/DF-1細(xì)胞的最佳培養(yǎng)溫度也為39℃。37℃培養(yǎng)會影響細(xì)胞狀態(tài),建議提前準(zhǔn)備專用培養(yǎng)箱。
若我們在培養(yǎng)細(xì)胞過程中出現(xiàn)了空泡,也有可能是細(xì)胞凋亡或是營養(yǎng)不夠等原因,針對不同的情況需要采用不同的解決辦法。在實(shí)驗(yàn)中,我們可以通過時(shí)刻關(guān)注細(xì)胞的狀態(tài),及時(shí)換液,采用優(yōu)質(zhì)血清,保證細(xì)胞所需營養(yǎng)充足等,避免空泡的出現(xiàn)。
●參考文獻(xiàn)●
[1] Jing Q C , Zhao J , Zhao B X , et al. The vacuolization and differentiation of vascular endothelial cells by a γ-butyrolactones derivative[J]. Journal of Shandong University, 2008.
[2] 張浩赟等. 胞質(zhì)空泡化的研究進(jìn)展[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘, 2017, 17(34):3.