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細(xì)胞學(xué)堂 | 血清批次存在差異怎么辦

來源:Pricella  瀏覽量:  發(fā)布時間:2022-08-16 14:54:56

血清對細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的重要性毋庸置疑。在往期的細(xì)胞學(xué)堂推文中,普諾賽向大家介紹了血清沉淀的相關(guān)問題。除了血清沉淀之外,血清批次差異也是血清使用過程中經(jīng)常會遇到的問題,也是很多科研工作者在挑選血清時容易忽視的問題。

1

不同批次血清存在差異的原因

1

血清來源于動物,其組成成分有上千種左右;

2

血清組成及含量常隨供血動物的年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件而異;

3

每個批號的組分百分比含量都不固定,所以批間差異是存在的。


2

不同批次血清存在差異時細(xì)胞的表現(xiàn)

不同批次血清存在差異時,細(xì)胞形態(tài)會發(fā)生變化,但其對細(xì)胞的影響遠(yuǎn)不止是形態(tài)的變化。整體來說,主要表現(xiàn)在以下幾個方面:

細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變;

細(xì)胞貼壁性改變;

細(xì)胞產(chǎn)生空泡細(xì)胞;

細(xì)胞生長變得緩慢;

細(xì)胞不增殖;


640 (1)_副本.jpg
640_副本.jpg

圖1. SH-SY5Y細(xì)胞更換血清后形態(tài)變化


640.jpg
640 (1).jpg

圖2.  Hela細(xì)胞更換血清后形態(tài)變化


640 (2).jpg
640 (3).jpg

圖3. SK-N-AS細(xì)胞更換血清出現(xiàn)圓形細(xì)胞


3

如何避免更換血清后對細(xì)胞的影響

?

使用新的血清前,先使用血清試用,如果試用效果好,則可購買和試用裝批次相同的正裝,囤積半年或一年的用量,避免批間差造成實(shí)驗(yàn)波動(胎牛血清在-20°C保存可達(dá)5年) ;

?

建議加高血清比例到15%或20%

?

試用新批次,如果新批次效果好,可更換血清批次;

?

馴化過渡;

?

輕度不適應(yīng)細(xì)胞可自己調(diào)整。


4

血清適用一周后細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)正常

L-929

640 (2)_副本.jpg
640 (3)_副本.jpg

圖4. L-929細(xì)胞剛更換血清(左) 適用一周后(右)


Renca

640 (4).jpg
640 (5)_副本.jpg

圖5. Renca細(xì)胞剛更換血清(左) 適用一周后(右)

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